Спектрофотометры, их устройство. Спектрометр - это что такое и для чего используют? Как устроен спектрофотометр

Спектрофотометры предназначены для измерения коэффициента пропускания, оптической плотности и концентрации веществ в жидких пробах и могут быть применены в лабораториях различного профиля.

Выбор приборов для проведения спектрофотометрических методик довольно-таки широк. Приборы отличаются, прежде всего спектральным диапазоном (видимая область спектра или область, включающая УФ), спектральной шириной щели, погрешностью и воспроизводимостью установки длины волны, наличием сканирования спектров, комплектацией, типом установки длины волны (ручная или автоматическая — программная) и т.д.

Производители спектрофотометров и основные модели

Среди приборов, продающихся на российском рынке, можно выделить следующие модели и производителей:

— (модели В-1100, УФ-1100, УФ-1200, УФ-3000, УФ-3100, УФ-3200, УФ-6100). Производятся в Китае по заказу и под контролем российской компании «Промышленные экологические лаборатории».

— Спектрофотометры серии ПЭ (ПЭ-5300ВИ, ПЭ-5400ВИ, ПЭ-5400УФ). Приборы производятся российской компанией «ЭКРОСХИМ».

— Спектрофотометр КФК-3-01 (Концентрационный фотоэлектрический фотометр). Данный прибор производится Загорским оптико-механическим заводом (ЗОМЗ) и является усовершенствованной моделью КФК-3, который применялся практически в любой лаборатории СССР.

— Спектрофотометр КФК-3КМ производства «ЮНИКО-СИС», Россия.

— Спектрофотометры СФ-56 и СФ-2000 для работы в диапазоне 190–1100 нм. Приборы производятся российской компанией «ОКБ Спектр»

— Спектрофотометры UNICO (модели 1201, 1205, 2100, 2800, 2802, 2802S, 2804, 2100UV). Производитель United Products & Instruments, Inc.», США, дистрибьютор в России — компания «ЮНИКО-СИС»

— Спектрофотометры LEKI (модели SS1104, SS1207, SS1207 UV, SS2107, SS2107UV, SS2109UV, SS2110UV). Приборы производятся MEDIORA, Финляндия, дистрибьютором в России является компания «Лабораторное оборудование и приборы».

Все указанные приборы внесены в реестр средств измерения и могут быть использованы в аккредитованной лаборатории.

Технические характеристики и особенности моделей

Ниже будут рассмотрены основные технические характеристики, особенности и цена наиболее популярных моделей спектрофотометров.

Спектрофотометры B-1100 и УФ-1100 серии Эковью

Выпускаются с 2016 года и пришли на смену снятым с производства спектрофотометрам серии ПЭ Промэколаб. Приборы серии ПЭ Промэколаб работают во многих лабораториях и хорошо себя зарекомендовали. Пришедшие на смену модели Эковью обладают улучшенными техническими характеристиками и усовершенствованным программным обеспечением.

Особенности:

• Наличие цветного дисплея

• Спектральный диапазон (модель B-1100), нм: от 315 до 1050;
• Спектральный диапазон (модель УФ-1100), нм: от 200 до 1050;

Ориентировочная цена спектрофотометра B-1100 – 75000,00 руб. , УФ-1100 – 148000,00 руб.

и УФ-1200 серии Эковью

Приборы отличаются от моделей В-1100 и УФ-1100 улучшенными характеристиками, дополнительными функциями программного обеспечения. наличием большого цветного сенсорного экрана, что является уникальным для приборов данного класса. Также приборы снабжены специальными шаговыми двигателями, снижающими шумность работы. Как и в моделях предыдущей серии приборы оснащены системой самокалибровки и не требуется использования специальных контрольных светофильтров.

Особенности:

• Наличие цветного сенсорного дисплея и интуитивно-понятного интерфейса;
• Передача данных на внешнее устройство хранения
• Перенос градуировочных кривых между однотипными проборами
• Возможность сохранения результатов измерений в памяти прибора
• Наличие системы подсказок оператору, которая облегчает работу на приборе
• Автоматическая (программная) установка длины волны
• Большое кюветное отделение, позволяющее использовать кюветы с длиной оптического пути до 100 мм.
• Система автоматической юстировки длины волны (нет необходимости в контроле точности пробора с помощью светофильтров)
• Наличие USB-разъема

Основные технические характеристики:

• Спектральный диапазон (), нм: от 315 до 1050;
• Спектральный диапазон (модель УФ-1200), нм: от 190 до 1050;
• Диапазон измерений спектральных коэффициентов направленного пропускания, %: от 0, 1 до 99;
• Диапазон показаний спектральных коэффициентов направленного пропускания, %: от 0 до 200;
• Диапазон показаний оптической плотности, Б: от -0,3 до 3,0;
• Погрешность установки длин волн, нм, не более: ±1,0
• Спектральная ширина щели, нм: 4,0

Ориентировочная цена спектрофотометра B-1200 – 115000,00 руб., УФ-1200 – 198000,00 руб.

Спектрофотометры серии ПЭ

Компания «Экросхим» (бывшая «Экохим») выпускает спектрофотометры ПЭ-5300ВИ, ПЭ-5400ВИ и ПЭ-5400УФ. Приборы предназначены для проведения спектрофотометрических методик в видимой и УФ области спектра. Приборы имеют регистрационное удостоверение на медицинское изделие (РУ) и могут быть использованы в медучреждениях.

Спектрофотометр ПЭ-5300ВИ

Прибор имеет ручную установку длины волны с точностью 2 нм, предназначен для измерения в видимой области спектра, в базовой комплектации снабжен трехпозиционным кюветодержателем на стандартные кюветы КФК (ширина 24 мм), при использовании дополнительных переходников (входят в комплект поставки) возможна работа с кюветами европейского типа (ширина 10 мм). Большое кюветное отделение позволяет работать с кюветами с длиной оптического пути до 100 мм. Возможна комплектация кюветодержателем на 4 кюветы шириной 10 мм (европейский стандарт) длиной оптического пути от 5 до 50 мм. Наличие USB разъема для подключения ПК.

Основные технические характеристики:

• Спектральный диапазон: 325-1000 нм.
• Погрешность установки длины волны, не более: ±2 нм.
• Воспроизводимость установки длины волны, не более: 1 нм.
• Пределы допускаемой абсолютной погрешности при измерении спектральных коэффициентов направленного пропускания, не более: ±0,5 %Т.
• Диапазон измерений оптической плотности: от 3,000 до 0,000;

Ориентировочная цена спектрофотометра ПЭ-5300ВИ — 75000,00 руб.

Спектрофотометр ПЭ-5400ВИ и ПЭ-5400УФ

Приборы имеет автоматическую (программную) установку длины волны с точностью 1 нм, предназначены для измерения в видимой и УФ области спектра, в базовой комплектации снабжены четырехпозиционным кюветодержателем на стандартные кюветы КФК (ширина 24 мм), при использовании дополнительных переходников (входят в комплект поставки) возможна работа с кюветами европейского типа (ширина 10 мм). Большое кюветное отделение позволяет работать с кюветами с длиной оптического пути до 100 мм. Возможна комплектация кюветодержателем на 6 кювет толщиной 10 мм с длиной оптического пути от 5 до 50 мм.

В приборах серии ПЭ-5400 предусмотрена возможность сканирования спектра с использованием специального программного обеспечения SC5400 поставляемого отдельно. Наличие USB разъема для подключения ПК.

Основные технические характеристики:

• Спектральный диапазон (для модели ПЭ-5400ВИ): 315-1000 нм.
• Спектральный диапазон (для модели ПЭ-5400УФ): 190-1000 нм.
• Спектральная ширина щели: 4 нм.
• Погрешность установки длины волны: не более ±1 нм.
• Воспроизводимость установки длины волны: ± 0,5 нм.
• Пределы допускаемой абсолютной погрешности при измерении спектральных коэффициентов направленного пропускания, не более: ±0,5 %Т (315-1000 нм) и ±1,0 %Т (190-315 нм).
• Диапазон измерения оптической плотности: от 3,000 до 0,000;
• Диапазон измерения коэффициента направленного пропускания: от 0,0 до 100,0%.

Ориентировочная цена спектрофотометра ПЭ-5400ВИ — 109000,00 руб., ПЭ-5400УФ — 167000,00 руб.

Спектрофотометр КФК-3-01-«ЗОМЗ» (фотометр фотоэлектрический)

Прибор выпускается одним из старейших предприятий оптической отрасли «Загорским оптико-механическим заводом». Завод был основан в 1935 году и выпускал известные всем химикам спектрофотокалориметры КФК-2 и КФК-3.

КФК-3-01 представляет собой малогабаритный универсальный спектрофотометр, предназначенный для анализа жидких растворов с использованием спектрофотометрических методик в видимой области спектра.

Прибор выпускается в трех вариантах исполнения: КФК-3-01-«ЗОМЗ» — базовая модель; КФК-3-02-«ЗОМЗ» — прибор с термостатируемым кюветным отделением; КФК-3-03-«ЗОМЗ» — фотометр с проточной кюветой с насосом и внешним термостатом для подготовки проб.

Прибор снабжен кюветодержателем для установки кювет с длиной оптического пути 1-100 мм. Фотометры КФК-3-«ЗОМЗ» имеют регистрационное удостоверение на медицинское изделие (РУ) и могут быть использованы в медицинской практике.

Основные технические характеристики:

• Спектральный диапазон: 315-990 нм;
• Погрешность установки длины волны ±3 нм
• Выделяемый спектральный интервал, нм, не более: 5 нм;
• Диапазон измерения коэффициента пропускания, %: 1-100
• Диапазон измерения оптической плотности, Б: 0-3
• Диапазон измерений концентрации, ед. конц. 0,001-9999
• Погрешность измерения коэффициента пропуская ±0,5%

Ориентировочная цена спектрофотометра КФК-3-01-«ЗОМЗ» — 73000,00 руб.

Спектрофотометр КФК-3КМ

Спектрофотометр работает в видимой области спектра (325-1000 нам), измеряет оптическую плотность, коэффициент пропускания и концентрацию растворов и предназначен для реализации широкого круга спектрофотометрических методик. Прибор выпускается в России из импортных комплектующих, имеет яркий и необычный дизайн.

По возможностям и основным характеристикам полностью заменяет ФЭК, КФК-2, КФК-3, КФК-5.

Особенности:

• Простота использования, интуитивно-понятный интерфейс;
• Подключается к компьютеру через порт RS-232C (COM-порт) и работа со специализированным ПО.
• Наличие регистрационного удостоверения на медицинскую технику (РУ) , прибор может использоваться в медицинских учреждениях;
• Удобная 10-и значная клавиатура;
• Функция программирования для создания и сохранения градуировочных графиков;
• Работа с кювета от 5 до 100 мм стандартной толщины (24 мм, стандартные кюветы для КФК);
• Наличие переходников под кюветы европейского стандарта шириной 10 мм;
• Энергонезависимая память для сохранения измерений.

Основные технические характеристики:

• Спектральный диапазон: 325-1000 нм
• Ширина спектральной щели: 5 нм
• Погрешность установки длины волны, не более 2 нм
• Повторяемость установки длины волны — 1нм
• Диапазон измерений коэффициента пропускания (Т): 0-125%
• Диапазон измерения оптической плотности (А): -0,1-2,5
• Погрешность определения коэффициента пропускания, не более 1.0%Т

Ориентировочная цена спектрофотометра КФК-3-КМ — 80000,00-85000,00 руб. Цена прибора зависит от курса доллара.

Электронный прибор, с помощью которого определяется состав веществ и их соединений в эмульсиях, взвесях и растворах называется медицинским спектрофотометром. Устройство имеет два наиболее известных названия: фотоэлектрический фотометр и фотоэлектроколориметр. Спектрофотометры используются в различных сферах, но больше всего они нашли свое применение в медицине и фармацевтике. Приборы отличаются высокой точностью и позволяют сэкономить реактивы и время на проведения исследования.

Особенности спектрофотометров

Самые первые фотометры нуждались в участии медицинского работника для проведения исследования. Специалист должен был сравнивать и фиксировать полученные с устройства показатели. Данные сопоставлялись с общепринятыми нормативами. На смену таким приборам пришли автоматизированные фотоэлектроколориметры.

Спектрофотометры – это современное медицинское оборудование, которое предназначается для изучения и анализа свойств предметов либо веществ с помощью электромагнитного излучения. Световые лучи проходят сквозь пробу или отражаются от нее. Прибор сравнивает поток света, который первоначально направляется на биоматериал с излучением, проходящим сквозь образец либо отражающим от его поверхности.

Для проведения анализа сканируется широченный диапазон волн: начиная от 160 нм (ультрафиолет), заканчивая 3300 нм (инфракрасные лучи), с помощью чего получается максимально точная информация о веществе.

Спектрофотометрическая методика основана на том, что каждый предмет обладает особенными спектральными характеристиками. Именно поэтому во время проведения анализа не играет роли температурный режим и агрегатное состояние образца. Особенностью спектрофотометра является возможность проведения качественных и количественных исследований.

Главным плюсом фотоэлектрического фотометра есть вывод полученной информации на дисплей (лаборант может увидеть состав пробы, наличие и численность примесей). С помощью специальных световых фильтров устройство определяет в образце не менее 3-5 составляющих компонентов.

Сферы применения

Спектрофотометры используются для исследований в биохимии (анализируются липиды, электролиты, субстраты, ферменты), иммунохимии (проводится анализ ламбда, ферритин, миоглобин, микроальбумин, гаптоглобин), бактериологии. Для анализа качества еды и воды (сточной, природной и питьевой) применяется фотоэлектроколориметр. При определении качественных характеристик воды определяется мутность и цвет жидкости, наличие тяжелых металлов и поверхностно-активных компонентов, содержание нитритов, фосфатов, фенолов и сульфатов.

Спектрофотометр пригодится для проведения научных, гормональных, экологических и специальных исследований. В отделениях санитарно-эпидемиологического надзора обязательным является наличие данного прибора. Кроме медицины оборудование используется в сельском хозяйстве и промышленной отрасли.

Фотоэлектрический фотометр нужен для:

• выявления чистоты исследуемых образцов и нахождения примесей;
• измерения в жидкостях оптической плотности и ее изменений;
• определения концентрации пробы (исследование проводится в медицинских учреждениях);
• изучения, анализа состава и химического строения веществ, образцов и реактивов;
• спектральной диагностики.

Фотоэлектроколориметр – это устройство, которое применяется для проведения различных исследований: медицинских; биологических; фармацевтических; химических. Благодаря точным результатам, которые появляются на экране оборудования, доктор может узнать характеристику реагентов и назначить пациенту эффективное лечение.

Как устроен прибор?

Абсолютно все автоматизированные фотоэлектроколориметры состоят из: источника света (вольфрамовой, дейтериевой или галогено-дейтериевой лампы); усилителя сигналов; фотоприемника; монохроматора; оптических составляющих (световодов, зеркала, призмы и стекла); отсека для реагента.

Монохроматор содержит дифракционную решетку либо призму, которые выделяют излучение определенной длины волны. В различных моделях есть от одного до четырех отсеков для проб. С помощью фотоприемников спектрофотометр фиксирует уровень светового излучения, который проходит сквозь биологический материал.

Наиболее современные приборы укомплектованы фотодиодной матрицей, в состав которой входит встроенный датчик. Чип преобразует световой сигнал в электрический, это фиксируется микроконтроллером и высвечивается на мониторе оборудования. Не достаточно мощные приборы обрабатывают волны с различной длиной постепенно, и только потом выводят результаты на дисплей. От количества фотодиодных датчиков зависит производительность и информативность спектрофотометра.

С помощью приборов с фотодиодной матрицей можно проводить оперативные исследования не отходя от производства либо во время возникновения химической реакции. Это позволяет детально проанализировать состояние реакционных веществ.

Особенности работы устройства

Спектрофотометрическая методика основана на измерении степени отражения или поглощения монохроматических световых лучей. Во время исследования посторонние факторы не могут влиять на результативность анализа. Все приборы работают на двух разновидностях схем. В первом случае на пробу попадает монохроматический световой луч с определенной длиной волны, который после прохождения через образец направляется на фотоприемник, измеряющий разницу между потоками.

Суть второй схемы заключается в том, что на реагент попадает световой поток прямо от лампы, затем монохроматор выделяет небольшой пучок и направляет его к фотоприемнику.

Спектрофотометры бывают однолучевыми и двухлучевыми. В приборах с одним лучом для измерения применяются коэффициенты коррекции. В случае двухлучевой диагностики один луч попадает на пробу, а второй – на эталонное значение. Оборудование с двумя лучами более точное, информативное и менее чувствительное к окружающим факторам.

Правила выбора спектрофотометра

При подборе устройства необходимо учитывать сферу его применения и выполняемые задачи. Фотоэлектрические фотометры бывают переносными и стационарными. Портативные аппараты имеют небольшой вес, компактные и легкие в использовании. Стационарные приборы устанавливаются в медицинских учреждениях и диагностических центрах. С помощью этих устройств проводятся более сложные измерения. Такие спектрофотометры могут подключаться к персональному компьютеру с помощью кабеля, а полученные данные подлежат архивированию, обработке и распечатке на принтере.

При выборе медицинского аппарата нужно учитывать: спектр действия (диапазон); длину волны; многофункциональность устройства; габариты; цену; вероятность проведения определенных исследований; количество секций для реагентов; способ получения результатов. Также необходимо обратить внимание на штатную комплектацию модели спектрометра, потому как практически все современные приборы продаются с кюветом и чашкой Петри.

Спектрофотометр - это инструмент, который измеряет интенсивность излучения или количество фотонов на разных длинах волн. Этот научный инструмент также используется для исследовательских целей в молекулярной биологии для измерения роста бактерий.

Спектрофотометр идентифицирует передачу определенного вещества путем определения наблюдаемого цвета. Инструмент обычно используется для измерения концентрации РНК и . Кроме того, ферментативные и химические реакции изменяют цвет с течением времени, а спектрофотометр полезен для измерения различных изменений цвета.

Как работают спектрофотометры?

Спектрофотометр использует источник света для создания отдельных длин волн видимого света, одновременно создавая длины волн света в инфракрасном и ультрафиолетовом диапазонах. Дифракционная решетка и фильтры делят свет на отдельные длины волн, направляя небольшой диапазон длины волны через предоставленный образец. Фотодетектор преобразует свет, полученный через образец, в ток, отправленный в процессор сигналов. После того, как процессор сигналов преобразует ток, значения концентрации, поглощающая способность и коэффициент пропускания отображаются на цифровом дисплее прибора.

Устройство спектрофотометра

Каковы компоненты спектрофотометра?

Спектрофотометр имеет несколько частей, которые включают фильтр, фотодетектор, источник света и процессор сигналов. Однако два основных компонента состоят из фотометра и спектрометра. Фотометр измеряет интенсивность света, в то время как спектрометр измеряет, производит и рассеивает свет. Эти компоненты объединяются, образуя два разных типа спектрофотометра.

Типы спектрофотометров

1. однолучевой;
2. двухлучевой;

Существуют однолучевой спектрофотометр и двухлучевой спектрофотометр. Спектрофотометр с двойным лучом сравнивает интенсивность света между двумя световыми путями, в то время как однолучевой спектрофотометр измеряет интенсивность света до и после каждого образца. Спектрофотометр с двойным лучом измеряет коэффициент отражения различных жидких растворов и образца для испытаний, прежде чем давать точные значения на цифровом дисплее. Однако эти значения варьируются от 20 до 2500 нанометров.

Как использовать спектрофотометры?

Для использования спектрофотометра очистите кювету. Важно надеть перчатки, так как любые отпечатки пальцев или грязь, могут повлиять на результаты. Затем добавьте раствор и установите спектрофотометр на предпочтительную длину волны. Поместите пустую кювету внутрь инструмента и нажмите кнопку «установить нуль», чтобы калибровать прибор на желаемую длину волны. Добавьте решение для расчета поглощающей способности.

Закон Беэр-Ламберта в Спектрофотометрии

Для использования спектрофотометра важно понимать само понятие "спектр света" и знать закон Бера-Ламберта . Спектр состоит из радуги цветов, создаваемых, когда композитный свет, такой как белый свет, разделяется на несколько компонентных цветов. Спектрофотометрия использует источник света, коллиматор, монохроматор, раствор и детектор.

Уравнение закона Беэр-Ламберта показывает линейную зависимость между впитывающей способностью и концентрацией образца. Это понимание требует определения того, что поглощающая способность прямо пропорциональна длине пути кюветы, а также любому поглощению предпочтительного образца. Реакции измеряются увеличением поглощения, поскольку наблюдаются изменения цвета. Научные машины, такие как спектрофотометры или , помогают улучшить исследования в лабораториях химии, биологии и биохимии.

Где применяется спектрофотометр и как измеряет? Все, что Вы должны знать

Как уже говорилось, спектрофотометр является одним из научных инструментов, широко распространенных во многих исследовательских и промышленных лабораториях. Спектрофотометры используются для исследований в лабораториях физики, молекулярной биологии, химии и биохимии. Как правило, название относится к ультрафиолетовой видимой (UV-Vis) спектроскопии.

Энергия света зависит от длины волны, обычно обозначаемой как лямбда. Хотя электромагнитный спектр распространяется в огромном диапазоне длин волн, большинство лабораторий может измерять только небольшую их часть. UV-Vis Spectroscopy измеряет от 200 до 400 нанометров (нм) для измерений ультрафиолетового света и до приблизительно 750 нм в видимом спектре.

Для УФ-видимой спектроскопии образцы обычно содержатся и измеряются в небольших контейнерах, называемых кюветами. Они могут быть пластичными, если используются в видимом спектре, но должны быть кварцевыми или плавлеными кварцами, если используются для измерений в ультрафиолетовых лучах. Есть некоторые машины, которые могут использовать стеклянные пробирки.

Видимая спектроскопия часто используется в промышленности для колориметрии. Используя этот метод, образцы измеряются на нескольких длинах волн от 400 до 700 нм, и их профили поглощения сравниваются со стандартом. Этот метод часто используется производителями текстиля и чернил. Другими коммерческими пользователями UV-Vis Spectroscopy являются судебно-медицинские лаборатории и принтеры.

В биологических и химических исследованиях растворы часто измеряются путем измерения степени поглощения света на определенной длине волны. Значение, называемое коэффициентом экстинкции, используется для расчета концентрации соединения. Например, лаборатории молекулярной биологии используют спектрофотометры для измерения концентрации образцов ДНК или РНК. Иногда у них есть продвинутый аппарат, называемый спектрофотометром NanoDrop ™, который использует долю количества образца по сравнению с тем, который используется традиционными спектрофотометрами.

Чтобы количественная оценка была действительной, образец должен соответствовать закону Бера-Ламберта. Это требует, чтобы поглощение было прямо пропорционально длине пути кюветы и поглощению соединения. Есть таблицы коэффициентов вымирания, доступные для многих, но не для всех соединений.

Многие химические и ферментативные реакции меняют цвет с течением времени, и спектрофотометры очень полезны для измерения этих изменений. Например, полифенолоксидазы, которые приводят к коричневому цвету плодов, окисляют растворы фенольных соединений, превращая прозрачные растворы в те, которые имеют видимую окраску. Такие реакции могут быть проанализированы путем измерения увеличения поглощения при изменении цвета. В идеале скорость изменения будет линейной, и по этим данным можно рассчитать показатели. Более продвинутый спектрофотометр будет иметь термостатированный кюветный держатель для проведения реакций при точной температуре, идеальной для фермента.

Микробиологические и молекулярно-биологические лаборатории часто используют спектрофотометр для измерения роста культур бактерий. Эксперименты по клонированию ДНК часто проводятся на бактериях, и исследователи должны измерить стадию роста культуры, чтобы знать, когда проводить определенные процедуры. Они измеряют поглощение, которое известно как оптическая плотность (OD), на спектрофотометре. По ОД можно судить, активно ли делятся бактерии или начинают ли они умирать.

Спектрофотометры используют источник света для освещения массива длин волн через монохроматор. Затем это устройство пропускает узкую полосу света, и спектрофотометр сравнивает интенсивность света, проходящего через образец, с интенсивностью света, проходящей через контрольное соединение. Например, если соединение растворяют в этаноле, эталоном будет этанол. Результат отображается как степень поглощения разности между ними. Это указывает на поглощение образца соединения.

Причиной такого поглощения является то, что как ультрафиолетовый, так и видимый свет имеют достаточно энергии для возбуждения химических веществ до более высоких уровней энергии. Это возбуждение приводит к более высокой длине волны, которая видна, когда поглощение наносится на график в зависимости от длины волны. Различные молекулы или неорганические соединения поглощают энергию на разных длинах волн. Те с максимальным поглощением в видимой области видны как окрашенные человеческим глазом.

Растворы соединений могут быть прозрачными, но поглощать в УФ-диапазоне. Такие соединения обычно имеют двойные связи или ароматические кольца. Иногда имеется один или несколько обнаруживаемых пиков, когда степень поглощения отображается в зависимости от длины волны. Если это так, это может помочь в идентификации некоторых соединений путем сравнения формы графика с формой известных контрольных графиков.

Существует два типа ультрафиолетовых спектрофотометров: однолучевой и двухлучевой. Они отличаются тем, как они измеряют интенсивность света между эталонным и тестовым образцом. Двухлучевые машины измеряют эталонный и тестовый состав одновременно, в то время как однолучевые машины измеряют до и после добавления тестируемого состава.

Спектрофотометр СФ-46 предназначен для выполнения спектрофотометрических измерений в области 190 – 1100 нм. С его помощью можно измерить спектральные зависимости коэффициентов пропускания, оптической плотности твердых и жидких образцов, скорость изменения оптической плотности, определить концентрацию раствора в случае линейной зависимости оптической плотности от концентрации.

Блок-схема спектрофотометра представлена на рис. 1.

Рис. 1 Блок-схема спектрофотометра СФ-46

1 – осветитель; 2 – монохроматор; 3 – кюветное

отделение; 4 блок приемно-усилительный;

5 – микропроцессорная система

1 Оптическая схема

Излучение от источника 1 (рис. 2) или 1’ падает на зеркальный конденсор 2, который направляет его на плоское поворотное зеркало 3 и дает изображение источника излучения в плоскости линзы 4, расположенной вблизи входной щели 5 монохроматора.

Монохроматор построен по вертикальной автоколлимационной схеме.

Прошедшее через входную щель излучение падает на вогнутую дифракционную решетку 6 с переменным шагом и криволинейным штрихом. Дифракционная решетка, помимо диспергирующих свойств, обладает свойством фокусировать спектр. Применение переменного шага и криволинейного штриха значительно уменьшает аберрационные искажения вогнутой дифракционной решетки и позволяет получить высокое качество спектра во всем рабочем диапазоне.

Дифрагированный пучок фокусируется в плоскости выходной щели 7 монохроматора, расположенной над входной щелью 5. Сканирование осуществляется поворотом дифракционной решетки, при этом монохроматическое излучение различных длин волн проходит через выходную щель 7, линзу 8, контрольный или измеряемый образец, линзу 9 и с помощью поворотного зеркала 10 падает на светочувствительный слой фотоэлемента 11 или 12.

Для уменьшения рассеянного света и срезания высших порядков дифракции в спектрофотометре используются два светофильтра: из стекла ПС11 для работы в области спектра 230 – 450 нм и из стекла ОС14 для работы в области спектра 600 – 1100 нм. Смена светофильтров производится автоматически.

Линзы изготовлены из кварцевого стекла с высоким коэффициентом пропускания в ультрафиолетовой области спектра

Рис. 2 Оптическая схема спектрофотометра СФ-46

Для обеспечения работы спектрофотометра в широком спектральном диапазоне используются два фотоэлемента и два источника излучения сплошного спектра. Сурьмяно-цезиевый фотоэлемент с окном из кварцевого стекла применяется для измерений в области спектра от 190 до 700 нм, кислородно-цезиевый фотоэлемент – для измерений в области спектра от 600 до 1100 нм. Длина волны, при которой следует переходить от измерений с одним фотоэлементом к измерениям с другим фотоэлементом, указана в паспорте спектрофотометра.

Дейтериевая лампа предназначена для работы в области спектра от 190 до 350 нм, лампа накаливания – для работы в области спектра от 340 до 1100 нм. Для проверки градуировки используется ртутно-гелиевая лампа ДРГС-12.

Имея общие представления о принципе измерения спектров поглощения, можно попытаться синтезировать наипростейший спектрофотометр. Схема такого прибора приведена на рис. 1.1.19.

Рис. 1.1.19.

Такая схема спектрофотометра называется однолучевой. Здесь для измерения поглощения в один и тот же монохроматический луч света необходимо поочерёдно пропускать через кювету с образцом и кювету с растворителем (контроль).

Современные модели спектрофотометров построены по двулучевому принципу. В этом типе спектрофотометров монохроматический луч периодически направляется вращающимся зеркалом по двум каналам, в один из которых помещается кювета с образцом, в другой - кювета с растворителем. Лучи проходят образец и контроль в противофазе, и разница в интенсивностях регистрируется фото- метрирующей системой с последующей автоматической записью спектра на бланке в координатах:

К таким спектрофотометрам относится двулучевой регистрирующий прибор Specord М-40, оснащенный микроЭВМ, с высокой степенью автоматизации процессов измерения и возможностью математической обработки результатов (рис. 1.1.20).

Спектрофотометр Specord М-40 предназначен для измерения спектров поглощения в широком диапазоне длин волн

Я (200-900 нм) или V (50.000-11.000 см ~ х). Волновое число v

есть величина, обратная длине волны Я, т.е. измеряется в см ~ х.

Если Я выражается в нм, то: В приборе используются два источника света - дейтериевая лампа для ультрафиолетового диапазона 200-400 нм (50.000-25.000 см" 1) и лампа накаливания для видимой и ближней инфракрасной области 400-900 нм (25.000-

11.000 см" 1). Оптика прибора рассчитана на работу во всём указанном диапазоне и собрана с использованием отражательной (зеркальной) техники (плоские зеркала, конденсоры, реплики и т.д.).

В ультрафиолетовой области используется принцип двойной мо- нохроматизации излучения дейтериевой лампы. Дифракционный двойной монохроматор, состоящий из предварительного и главного монохроматора, обеспечивает высокое качество монохроматизации ультрафиолетового света и уменьшение мешающего рассеянного излучения. При развертке спектра в видимой области в ход лучей предварительного монохроматора вводится плоское зеркало-экран, которое перекрывает лучи водородной лампы и направляет на входную щель главного монохроматора свет от лампы накаливания. Таким образом, в видимой области работает только главный монохроматор.

Рабочий диапазон ультрафиолетовых решеток в предварительном и главном монохроматоре (1302 штр/мм) находится в пределах 54.000-28.000 см" 1 , а решётки видимого диапазона (651 штр/мм) в пределах 31.000-11.000 см" 1 . Переключение решеток от работающих в ультрафиолетовой области к предназначенным для видимой области происходит автоматически при волновом числе у =30.000 см" 1 . Обе решетки относятся к решеткам первого порядка (см. выше), а для предотвращения попадания световых лучей спектров более высоких порядков при работе в видимом диапазоне автоматически вводятся светофильтры (при переключении светофильтров развертка спектра на время также автоматически прекращается).

В спектрофотометре Specord М-40 предусмотрено регулирование ширины щелей. Входная и выходная щели монохроматора жёстко связаны между собой и управляются шаговыми двигателями от ЭВМ. Возможны два режима управления щелями:

• - с постоянной шириной щели при записи всего спектра,
• - с переменной шириной щели, величина которой может изменяться в ходе записи спектра.

Величину спектральной ширины щели можно задавать, выбирая фиксированные значения из набора щелей от 10 см" 1 до 200 см" 1 . Развертка спектра по длинам волн в спектрофотометре Specord М-40 производится шаговыми двигателями, работа которых контролируется встроенной в прибор микроЭВМ. Таким образом, измерение спектра производится по точкам - точно фиксированным длинам волн. Выбор ширины щелей и шага (числа точек) производится в зависимости от особенностей объекта и цели исследования.

Монохроматический луч заданной спектральной ширины (интервала с известной ^Кпшструм .) модулируется и затем направляется

Рис. 1.1.20.

1. Источник ультрафиолетового излучения - дейтериевая лампа; 2. Источник видимого и инфракрасного излучения - лампа накаливания; 3. Коллиматор предварительного монохроматора (вогнутое зеркало); 4. Конденсор лампы накаливания (вогнутое зеркало); 5. Дифракционная решетка предварительного монохроматора; 6. Плоское поворотное зеркало; 7,10. Входная (7) и выходная (10) щели главного монохроматора; 8. Коллиматоры главного монохроматора (вогнутые зеркала); 9. Дифракционная решетка главного монохроматора Эберта (а - реплика для ультрафиолетовой области, б - реплика для видимой и инфракрасной области); 11. Модулятор; 12. Вогнутые тороидальные зеркала; 13. Разделяющее попеременно два луча поворотное зеркало на оси мотора; 14. Плоское поворотное зеркало; 15. Кювета с образцом; 16. Кювета с контролем; 17. Фотоумножитель (ФЭУ).

поочерёдно с помощью вращающегося плоского зеркала с прорезями (13, рис. 1.1.20) в канал с объектом или в канал с растворителем (контролем). Камера для объекта разделена на два отделения. Большой отсек предназначен для работы с прозрачными растворами, а малый - для рассеивающих свет объектов.

Прошедшие через образец и контроль лучи поочерёдно в противофазе попадают на фотоумножитель, генерируя (если есть поглощение света в образце) переменный фототок (рис. 1.1.21). Если интенсивность лучей одинакова (поглощение двух кювет одинаково), то переменный фототок на выходе ФЭУ равен 0.

Рис. 1.1.21.

В противном случае возникает переменный ток, который усиливается. Сигнал обрабатывается, и результат измерения (пропускание

или оптическая плотность ) регистрируется на

бланке самописца спектрофотометра. Весь процесс измерения спектра и его воспроизведение осуществляется под контролем мик- роЭВМ, встроенной в прибор. Компьютеризация спектрофотометра дает возможность использования программ оптимального измерения и последующей математической обработки результатов, а также сохранения в памяти ЭВМ полученной информации в постоянной готовности для обработки.